IPTG诱导后直接-20℃冰冻 第二天融化后超声破碎 这样对蛋白活性

作者:admin 来源:未知 点击数: 发布时间:2019年08月12日

  IPTG诱导5h之后间接放在了-20摄氏度冰箱里

  第二天融化后破裂,对卵白表达 和活性有影响吗?

  超声破裂前提是 3s/3s80轮回5次40分钟 大肠杆菌如许破裂行不可?

  我感受没有影响

  不会,反而对破裂更有益

  超声破裂前提间隔时间能够长些

  别的,几多次几多时间视破裂环境而定

  总之,要菌液澄清不粘连即可

  该当没有影响。最好是离心后只把菌体沉淀冻存。

  菌体破裂的方式比力多,频频冻融破裂和超声破裂都比力常用,冻融一般保举急冻(液氮),超声的功率不要太大,我一般用50-100w,间隔时间长是为了包管温度不外高的,建议冰水浴超声,可是各类破裂的操作都需要视环境插手卵白酶抑止剂 PMSF等,

  这个嘛,要离心去除发酵液,提前分装好后放入-20℃冰箱,

  一般没有影响的,

  没有影响,我-20放了一个礼拜呢。

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